關(guān)鍵詞：活性構(gòu)象 應(yīng)答調(diào)控蛋白 

摘要：PhoB是PhoR/PhoB雙組分信號轉(zhuǎn)導(dǎo)系統(tǒng)(TCS)中的應(yīng)答調(diào)控蛋白,來自大腸桿菌,可以參與環(huán)境中自由Pi的調(diào)控應(yīng)答.PhoB擁有保守的磷酸化位點D53,當(dāng)Mg^2+存在時,會變成活性構(gòu)象,但是其中的機理尚不清楚.目前已經(jīng)有報道指出,自由態(tài)的應(yīng)答調(diào)控蛋白存在少量的活性構(gòu)象,而且它們和蛋白的激活過程相關(guān),但是這種活性構(gòu)象一般不穩(wěn)定,很難觀測到.本文以PhoBN^F20D作為模型,1H-15NHSQC和19F NMR譜圖顯示,自由態(tài)PhoBN^F20D在溶液中存在pre-active構(gòu)象,BeF3^-可以穩(wěn)定這種活性構(gòu)象,而且Mg^2+可以促進非活性構(gòu)象到活性構(gòu)象之間的轉(zhuǎn)化,在BeF3^-存在的情況下可以使PhoBN^F20D形成完全的活性構(gòu)象.同時我們利用Carr-Purcell-Meiboom-Gill(CPMG)弛豫彌散實驗證明了PhoBN^F20D存在兩態(tài)交換.

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