伽馬射線輻射結(jié)合亞硝基胍誘變選育他克莫司高產(chǎn)菌株

嚴(yán)凌斌; 張文州; 張祝蘭; 張引; 邱觀榮; 王德森; 連云陽(yáng) 福建省微生物研究所福建省新藥(微生物)篩選重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室; 福州350007; 泉州醫(yī)學(xué)高等專(zhuān)科學(xué)校; 泉州362100

關(guān)鍵詞:鏈霉菌 他克莫司 發(fā)酵 輻射誘變 亞硝基胍 

摘要:為了選育穩(wěn)定高產(chǎn)的他克莫司菌株,提高發(fā)酵水平,對(duì)他克莫司出發(fā)菌株采用450 Gy劑量的^60Co γ輻射誘變及3 mg/mL亞硝基胍(NTG)處理30 min誘變,并分別結(jié)合鏈霉素和慶大霉素進(jìn)行抗性篩選.經(jīng)選育獲得一株高產(chǎn)、遺傳穩(wěn)定的他克莫司突變株FIM-17-17,該菌株的搖瓶發(fā)酵水平較出發(fā)菌株提高了65%.考察該突變株的穩(wěn)定性,及樹(shù)脂AB-8、D101、HT60、XAD16、HP20和XDA-8對(duì)發(fā)酵水平的影響,并在容量1 t的發(fā)酵罐進(jìn)行中試發(fā)酵驗(yàn)證.結(jié)果表明,突變株FIM-17-17遺傳穩(wěn)定,且在發(fā)酵培養(yǎng)基中添加2%的D101樹(shù)脂后,發(fā)酵水平又提高了29.8%,發(fā)酵罐中試發(fā)酵水平平均達(dá)1 319 μg/mL.結(jié)果提示,利用^60Co γ射線輻射和NTG復(fù)合誘變能有效獲得他克莫司高產(chǎn)菌株.

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