三氟拉嗪與八肋游仆蟲中心蛋白N端半分子的結合及對蛋白功能的影響

葉旭文; 張文龍; 王志軍; 趙亞琴; 楊斌盛 山西大學分子科學研究所; 化學生物學與分子工程教育部重點實驗室; 太原030006

關鍵詞:三氟拉嗪 光譜分析 

摘要:采用熒光光譜、圓二色光譜(CD)、等溫滴定量熱分析(ITC)、電泳及分子對接等分析技術,研究了三氟拉嗪(TFP)與八肋游仆蟲中心蛋白N端半分子(apoN-EoCen)的結合,考察了TFP對apoN-EoCen性質的影響.結果表明,在室溫下10 mmol/L Hepes緩沖溶液(pH=7.4)中,TFP與apoN-EoCen以摩爾比1∶1結合于apoN-EoCen的第二個EF-手的E,F螺旋之間,條件結合常數約為10^3L/mol;TFP的結合導致蛋白質二級結構發生改變,α螺旋含量減小,Tb^3+敏化熒光強度降低83%,apoN-EoCen切割DNA的類核酸酶活性明顯受到抑制;Tb^3+仍可占據復合物apoN-EoCen-TFP中蛋白質的2個金屬離子結合位置,條件結合常數約為7.0×10^5L/mol,TFP的結合不抑制金屬離子誘導的蛋白質聚集.

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