關(guān)鍵詞：dna甲基化 電化學(xué)傳感器 抗體 定量分析 

摘要：目的:構(gòu)建一種基于5-甲基胞嘧啶(5-mC)抗體的電化學(xué)生物傳感器,用于DNA多甲基化位點(diǎn)的定量分析。方法:采用納米金修飾金電極(AuNPs/Au),以自組裝方式依次將單鏈DNA(ssDNA)、巰基己醇(MCH)和靶DNA連接到AuNPs/Au上制備DNA電化學(xué)傳感器,經(jīng)過(guò)電化學(xué)表征檢測(cè)電極修飾效果;再以5-mC抗體特異性識(shí)別靶DNA中的甲基化位點(diǎn),并以辣根過(guò)氧化物酶標(biāo)記二抗(HRP-IgG)為信號(hào)示蹤物,優(yōu)化雜交時(shí)間及抗5-mC抗體濃度;采用差分脈沖伏安法(DPV)分別檢測(cè)非甲基化與不同數(shù)量甲基化DNA的電化學(xué)信號(hào),同時(shí)考察該方法的重復(fù)性與穩(wěn)定性。結(jié)果:電化學(xué)表征結(jié)果表明電極修飾成功,優(yōu)化實(shí)驗(yàn)條件結(jié)果顯示最優(yōu)雜交時(shí)間為90 min、最佳抗體濃度為10 mg/L,在該條件下DNA電化學(xué)傳感器能有效區(qū)分甲基化與非甲基化DNA,并且DPV峰電流的大小與DNA甲基化位點(diǎn)的數(shù)量呈線性關(guān)系,具有較好的重復(fù)性與穩(wěn)定性。結(jié)論:制備的DNA電化學(xué)傳感器能對(duì)多個(gè)位點(diǎn)的DNA甲基化定量檢測(cè),有望成為臨床DNA甲基化位點(diǎn)定量檢測(cè)的有效手段。

貴州醫(yī)科大學(xué)學(xué)報(bào)雜志要求:

{1}引用大型常用出土文獻(xiàn)合集，可使用括注，括注應(yīng)使用不同于正文的字體。第一次應(yīng)使用全稱，第二次可使用簡(jiǎn)稱。

{2}縮略語(yǔ)文題一般不使用縮略語(yǔ)，正文中盡量少用。必須使用時(shí)于首次出現(xiàn)處先敘述其全稱，然后括號(hào)注出中文縮略語(yǔ)或英文全稱及其縮略語(yǔ)，后兩者間用“，”分開(kāi)(如該縮略語(yǔ)已公知，也可不注出其英文全稱)。

{3}應(yīng)簡(jiǎn)明、確切，概括文章的要旨，一般不超過(guò)20個(gè)漢字，小三號(hào)黑體字。

{4}作者簡(jiǎn)介格式：姓名（出生年－），性別（少數(shù)民族），籍貫，職稱，學(xué)位/學(xué)歷，主要從事……研究。

{5}注釋?zhuān)翰捎媚_注（當(dāng)頁(yè)注，“每頁(yè)重新編號(hào)”），使用小5號(hào)字（由word軟件自動(dòng)生成），注釋序號(hào)使用右上標(biāo)的“①”。

注：因版權(quán)方要求，不能公開(kāi)全文，如需全文，請(qǐng)咨詢雜志社