基于SLAF-seq技術(shù)的古茶樹SNP位點開發(fā)

耿廣東; 陳立杰; 張素勤 貴州大學農(nóng)學院; 貴州貴陽550025; 貴州大學資產(chǎn)經(jīng)營辦公室; 貴州貴陽550025

關(guān)鍵詞:古茶樹 snp位點 高通量測序 分子標記 

摘要:為給古茶樹遺傳圖譜構(gòu)建、分子輔助育種和物種進化等研究提供參考,以48份貴州古茶樹種質(zhì)為研究對象,利用SLAF-seq技術(shù),獲取大量多態(tài)性SLAF標簽,進而開發(fā)一批特異性強、穩(wěn)定性高的單核苷酸多態(tài)性(SNP)位點。結(jié)果表明,利用獼猴桃參考基因組進行電子酶切預測,選擇HaeIII酶進行酶切,得到237773個SLAF標簽,其雙端比對效率為91.40%,酶切效率為96.41%,說明SLAF建庫正常。測序后各樣品所獲得的讀長數(shù)為1279534~8460233,測序質(zhì)量值Q30范圍為92.61%~94.88%,均值為93.84%,測序獲得的GC比例為43.52%~47.18%。共開發(fā)1656258個古茶樹SLAF標簽,樣品的平均測序深度為24.21×,其中多態(tài)性SLAF標簽有462897個,根據(jù)所獲得的多態(tài)性SLAF標簽來統(tǒng)計SNP位點信息,共得到2690638個群體SNP標記,根據(jù)完整度大于0.8且次要基因頻率(MAF)大于0.05的標準進行過濾,得到283376個高一致性的群體SNP標記。

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