關(guān)鍵詞:rna干擾 低氧 骨橋蛋白 肺動(dòng)脈平滑肌細(xì)胞
摘要:目的觀(guān)察慢病毒介導(dǎo)RNA干擾沉默骨橋蛋白(Osteopontin,OPN)基因?qū)Φ脱醮碳は耂D大鼠肺動(dòng)脈平滑肌細(xì)胞增殖的影響。方法SD大鼠肺動(dòng)脈平滑肌細(xì)胞分為四組:常氧對(duì)照組、低氧對(duì)照組、低氧+空病毒組、低氧+OPN沉默組,分別采用MTY法檢測(cè)各組細(xì)胞的增殖能力,實(shí)時(shí)熒光定量法檢測(cè)各組細(xì)胞OPNmRNA的表達(dá)情況,WesternBlotting法檢測(cè)各組細(xì)胞OPN蛋白表達(dá)水平。結(jié)果2%低氧環(huán)境培養(yǎng)PASMCs細(xì)胞48h,可使OPN的mRNA和蛋白表達(dá)量較常氧對(duì)照組增高,細(xì)胞增殖能力增強(qiáng),差異有顯著性(P〈0.05);肺動(dòng)脈平滑肌細(xì)胞慢病毒感染72h后低氧培養(yǎng)48h,可使OPNmRNA相對(duì)表達(dá)量和蛋白表達(dá)量均低于低氧對(duì)照組和低氧+空病毒組,且細(xì)胞的增殖能力降低,差異有顯著性(P〈0.05)。結(jié)論低氧刺激可使OPN表達(dá)量增加、肺動(dòng)脈平滑肌細(xì)胞增殖;慢病毒介導(dǎo)RNA干擾沉默OPN基因可抑制低氧刺激引起的大鼠肺動(dòng)脈平滑肌細(xì)胞增殖。
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