關鍵詞：杉木 cllar 基因克隆 序列分析 載體構建 

摘要：為探究杉木種子發育過程中無色花青素還原酶(LAR)基因在類黃酮生物合成途徑中對原花青素(PA)合成的分子調控機制,以杉木種子為試驗材料,通過RT-PCR結合RACE的方法成功克隆到杉木ClLAR基因全長,該基因的cDNA全長為1625bp,具有1個1242bp的開放閱讀框(ORF),編碼413個氨基酸。構建pCambia3301-ClLAR植物表達載體,運用凍融法將重組質粒轉至農桿菌GV3101,通過花序侵染法獲得擬南芥轉基因植株,利用Basta溶液和PCR驗證篩選出陽性苗,確定目的基因ClLAR已整合至擬南芥基因組中。研究結果為深入分析杉木ClLAR基因調控PA合成的分子機制和ClLAR蛋白功能奠定了基礎。

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