三甲基氯化錫誘導(dǎo)的非洲綠猴腎細(xì)胞蛋白質(zhì)表達(dá)譜改變

肖蕓; 朱麗瑾; 鞠莉; 錢(qián)亞玲; 張幸 斷江省醫(yī)學(xué)科學(xué)院衛(wèi)生學(xué)研究所; 杭州310013; 浙江大學(xué)醫(yī)學(xué)院公共衛(wèi)生系勞動(dòng)與環(huán)境衛(wèi)生研究所; 杭州310013

關(guān)鍵詞:三甲基氯化錫 vero細(xì)胞 微管蛋白 

摘要:目的分析三甲基氯化錫(trimethyhinchloride,TMT—C1)誘導(dǎo)的非洲綠猴腎細(xì)胞(vero細(xì)胞)和正常vero細(xì)胞之間差異表達(dá)蛋白質(zhì),以尋找相關(guān)的標(biāo)志物,探討TMT—C1所致腎損傷的分子機(jī)制。方法通過(guò)雙向凝膠電泳和液相色譜一電噴霧線(xiàn)性離子阱質(zhì)譜技術(shù)比較TMT.C1染毒的vem細(xì)胞和正常veto細(xì)胞之間蛋白質(zhì)表達(dá)譜的差異,蛋白免疫印跡技術(shù)分析其中的2個(gè)差異蛋白AnnexinA1和et6-Tubulin的表達(dá)以驗(yàn)證雙向電泳的結(jié)果,反轉(zhuǎn)錄熒光定量聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)技術(shù)進(jìn)一步分析AnnexinAl和僅6一Tubulin在mRNA水平的表達(dá)。結(jié)果比較TMT—C1染毒的vero細(xì)胞和正常vero細(xì)胞蛋白質(zhì)表達(dá)譜,共獲得15個(gè)差異蛋白點(diǎn),9個(gè)通過(guò)質(zhì)譜分析得到鑒定,3個(gè)上調(diào),6個(gè)下調(diào)。與對(duì)照組比較,各TMT.C1染毒組d6一Tubulin蛋白質(zhì)和mRNA表達(dá)水平均下調(diào),差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P〈O.01)。與對(duì)照組比較,各染毒劑量組AnnexinAl蛋白表達(dá)水平均上調(diào),25和50p.μmol/L組mRNA表達(dá)水平下調(diào),100μmol/L組的mRNA表達(dá)水平上調(diào),差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P〈0.01)。結(jié)論雙向凝膠電泳結(jié)合質(zhì)譜分析篩選到的9個(gè)差異表達(dá)蛋白與TMT.C1所致腎細(xì)胞毒性密切相關(guān),可作為早期診斷、治療及療效評(píng)價(jià)的候選生物標(biāo)志物。

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