關鍵詞:人腦膠質瘤細胞系44 亮氨酸重復序列免疫球蛋白樣蛋白1 表皮生長因子受體 放療增敏 真核表達質粒
摘要:目的研究亮氨酸重復序列免疫球蛋白樣蛋白1(LRIG1)對人腦膠質瘤細胞系44細胞(SHG44)的放療增敏作用。方法采用分子克隆技術,將構建的重組質粒p EGFP-C1-LRIG1轉染SHG44,并穩定表達后在熒光顯微鏡下觀察;逆轉錄聚合酶鏈反應(RT-PCR)技術研究放射照射后SHG44中目的基因LRIG1和表皮生長因子受體(EGFR)的信使核糖核酸(mRNA)表達情況;免疫組織化學法分析照射后SHG44中LRIG1和EGFR的蛋白表達差異;采用四甲基偶氮唑藍(MTT)法分析干預后SHG44的細胞增殖能力;細胞侵襲實驗(Transwell)分析干預后SHG44的腫瘤侵襲能力。結果重組質粒p EGFP-C1-LRIG1轉染SHG44細胞可穩定表達LRIG1;SHG44+p EGFP-C1-LRIG1細胞相對于SHG44、SHG44+p EGFP-C1細胞,LRIG1與EGFR基因的mRNA和蛋白的表達水平有顯著差異(P〈0.01);且SHG44+p EGFP-C1-LRIG1細胞的細胞活性及侵襲能力較SHG44、SHG44+p EGFP-C1細胞明顯下降(P〈0.01)。結論在膠質瘤SHG44細胞中過表達LRIG1基因可通過下調EGFR表達,抑制SHG44細胞的惡性生物學行為,增加放療敏感性。
中華神經外科疾病研究雜志要求:
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